人巨细胞病毒（HCMV）又称为人疱疹病毒 5 型（HHV-5），其感染率在我国高达 86%～96%。HCMV 是弱致病因子，绝大多数表现为无症状性感染；但在生理性免疫低下的胎儿和新生儿中，HCMV会引发发育性免疫缺陷和疾病，同时也会增加艾滋病和器官、骨髓移植患者等病理性免疫低下人群的病死率。

近日，来自普林斯顿大学分子生物学系的Ileana M. Cristea教授团队，在国际著名学术期刊Nature Communications上发表了最新的研究成果。研究人员运用基于质谱的蛋白质组学，监测了人巨细胞病毒感染期间数百种功能蛋白复合物的时间形成和解离，及宿主-宿主、病毒-宿主和病毒-病毒PPIs的动态变化。研究发现HCMV受体整合素- 1（ITGB1）与细胞外基质蛋白分离，并与CD63一起内化，是HCMV病毒增殖所必需的。研究为HCMV感染机制的研究和治疗提供了新的思路。

1、HCMV感染期间的TPCA分析

由蛋白相互作用形成的蛋白复合物在细胞中发挥着重要的作用，为研究HCMV感染对蛋白质相互作用的形成和解离的影响，研究人员应用TPCA法（thermal proximity coaggregation），高通量地监控HCMV感染中细胞内的蛋白复合物动态变化（图1a）。研究人员分别在HCMV复制周期的不同阶段收集原代人类成纤维细胞，37至64°C阶梯温度处理后（样本策略），采用TMT标记的定量蛋白质组技术定量不同温度下的可溶性蛋白(质谱策略)。研究共鉴定出大约5300种细胞和病毒蛋白，感染过程中病毒蛋白的丰度增加，这也与通过病毒复制的进程一致。

图3、IHCMW感染过程中的蛋白复合物变化

综上所述，本文使用热位移分析揭示了HCMV感染期间宿主-宿主和病毒-宿主蛋白缔合的时间变化。在HCMV感染的早期阶段，随着PI3K信号转导轴的激活，PI3K途径得以稳定。同样在感染早期，HCMV受体ITGB1被前病毒性四跨膜蛋白CD63内化。随着感染的进展，CD63定位于病毒组装复合体。该研究同时还揭示了易位蛋白IGF2R的前病毒作用，其定位从HCMV感染早期的细胞核周围扩散到病毒体成熟期间病毒装配复合体的积累。此外，内体转运复合物WASH和CCC在感染后期显示出增加的缔合，表明通过在病毒装配和流出过程中调节细胞内运输来发挥前病毒作用。

参考文献

Yutaka Hashimoto, et al., 2019, Temporal dynamics of protein complex formation and dissociation during human cytomegalovirus infection. Nat Commun.

本文景杰学术团队报道，欢迎转发到朋友圈。如有转载、投稿、等其他合作需求，请文章下方留言，或添加微信ptm-market咨询。